裂解液的最佳使用方法
1.
泳道1 中的裂解液降解。 对新鲜制备的裂解液进行超声处理通常可以释放核蛋白或膜蛋白,剪切 DNA,并使裂解液的粘度降低。在使用组织裂解液样品时,这种方法特别有用。CST 建议通过将探针完全浸入裂解液中 10-15 秒(3 遍以上),在中等或较低温度下用探针超声仪处理裂解液。 在每次超声处理之前和之后,请确保在冰上短暂冷却裂解液,并避免使裂解液起泡沫。 一些细胞系或组织富含蛋白质,以至于它们可能产生浓度过高的裂解液。在蛋白质印迹分析中,过度浓缩的裂解液无法有很好的电泳或结果表现,因为凝胶道中的总蛋白质太多。结果会导致条纹或脏污。
2.
泳道2 中的过度浓缩裂解液。 如果遇到浓度过高的裂解液,请在 SDS/DTT 中按 1:1 比例稀释,以将裂解液的总蛋白浓度降低一半。